Главная » 2014 » Сентябрь » 25 » Скачать Исследование антиоксидантного действия новых производных 3-гидроксипиридина в эксперименте. Чечет, Инна Валериановна бесплатно
6:36 AM
Скачать Исследование антиоксидантного действия новых производных 3-гидроксипиридина в эксперименте. Чечет, Инна Валериановна бесплатно
Исследование антиоксидантного действия новых производных 3-гидроксипиридина в эксперименте
Диссертация
Автор: Чечет, Инна Валериановна
Название: Исследование антиоксидантного действия новых производных 3-гидроксипиридина в эксперименте
Справка: Чечет, Инна Валериановна. Исследование антиоксидантного действия новых производных 3-гидроксипиридина в эксперименте : диссертация кандидата биологических наук : 03.00.13, 03.00.04 / Чечет Инна Валериановна; [Место защиты: Нижегор. гос. ун-т им. Н.И. Лобачевского] - Нижний Новгород, 2009 - Количество страниц: 160 с. ил. Нижний Новгород, 2009 160 c. :
Объем: 160 стр.
Информация: Нижний Новгород, 2009
Содержание:
Сокращения и условные обозначения
ВВЕДЕНИЕ
Глава 1 Обзор литературы
11 Механизмы свободнорадикального окисления
12 Повреждающее действие свободнорадикального окисления
13 Антиоксидантная система организма
14 Возможности ингибирования реакции свободнорадикального 18 окисления антиоксидантами
15 Стресс и реакции свободнорадикального окисления
151 Общее понятие стресса
152 Стресс и баланс про- и антиоксидантных систем организма
17 Основные характеристики производных пиридина с точки 27 зрения антиоксидантных свойств
171 Характеристика пиридина
172 Характеристика производных 3-оксипиридина
173 Связь химической структуры производных 3-оксипиридина и их 28 биологической активности
18 Лекарственные препараты - производные 3-оксипиридина
19 Клиническое применение препаратов 2-этил-6-метил-3- 34 оксипиридина
110 Новые производные 3-оксипиридина
Глава 2 Материалы и методы исследования
21 Основные этапы исследований
22 Схема эксперимента
23 Характеристика исследуемых соединений
24 Характеристика доз и пути введения исследуемых производ- 45 ных 3-оксипиридина
25 Моделирование острого иммобилизационного стресса
26 Характеристика методов исследования
261 Методы изучения общетоксического действия
2611 Метод изучения острой токсичности
2612 Метод изучения общего действия производных З-оксипиридина 49 в дозах 1% и 10% от ЛД50 на фоне иммобилизационного стресса
262 Методы определения показателей перекисного окисления липи- 50 дов
2621 Метод индуцированной биохемилюминесценции
2622 УФ-спектроскопия первичных и вторичных продуктов пере- 51 кисного окисления липидов
2623 Флюориметрический метод определения оснований Шиффа 52 (Fletcher DL, 1973)
263 Методы статистической обработки полученных результатов
Глава 3 Исследование общетоксического действия 3-оксипи- 55 ридина
31 Изучение острой токсичности производных З-оксипиридина
32 Изучение общетоксического действия производных 3-оксипи-ридина в дозах 1% и 10% от ЛД50 на фоне иммобилизационного стресса
Глава 4 Исследование показателей перекисного окисления липидов при введении производных З-оксипиридина в условиях иммобилизационного стресса
41 Исследование показателей индуцированной биохемилюминес- 76 ценции
42 Исследование показателей перекисного метаболизма
Глава 5 Осуждение результатов 113 ВЫВОДЫ 131 СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
СОКРАЩЕНИЯ И УСЛОВНЫЕ ОБОЗНАЧЕНИЯ
АКТГ - адренокортикотропный гормон
АОЗ - антиоксидантная защита
АОС - антиоксидантная система
АФК - активные формы кислорода
ГР -глутатионредуктаза
ДГЭА - дигидроэпиандростерон
ДК - диеновые конъюгаты
ДНК - дезоксирибонуклеиновая кислота
ИБС - ишемическая болезнь сердца
ИБХЛ - индуцированная биохемилюминесценция лд50 - средняя смертельная доза ош - основания Шиффа пол - перекисное окисление липидов
РСО - реакция свободно-радикального окисления сод - супероксиддисмутаза
СР - свободные радикалы
СРО - свободно-радикальное окисление тк - триеновые конъюгаты з-оп - три-оксипиридин
Введение:
В последние годы выяснению роли свободнорадикального окисления в норме и при патологических состояниях уделяется повышенное внимание. Свободные радикалы образуются в организме в результате метаболизма растворенных в тканях кислорода, и образующиеся при этом активные формы кислорода вызывают окисление мембранных липидов, белков, полисахаридов, нуклеиновых кислот (Конторщикова, 2000; Дюмаев, Воронина, Смирнов, 1995).
Биологические последствия свободнорадикального окисления могут быть разнообразными: перекисное окисление липидов плазматической и внутриклеточных мембран, нарушающее целостность и функции структур клетки, а также приводящее к освобождению медиаторов воспаления и токсинов; инактивация ферментов и рецепторов; повреждение ДНК, остановка ее репликации и мутагенез, что может вызывать тератогенный, канцерогенный или цитостатический эффект (Адо, 2000; Зайчик и соавт., 2005; Чеснокова и соавт., 2007).
Повреждающему действию свободных радикалов противостоит многоуровневая эндогенная антиоксидантная система, которая осуществляет баланс между свободнорадикальным окислением и антиокислительной системами («редокс-статус»), устраняющими их разрушительное действие. При интенсивном образовании свободных радикалов и при недостаточной активности анти-оксидантной системы возникает состояние, сопровождающееся усилением деструктивных процессов в тканях (окислительный стресс). Данный процесс вовлечен в патогенез значительного числа заболеваний (Чеснокова и соавт., 2007).
При окислительном стрессе патогенетически обоснованным является применение средств фармакологической коррекции процессов свободнорадикального окисления — экзогенных антиоксидантов. При острых состояниях требуется «сильный» антиоксидант, который, кроме того, должен хорошо растворяться в воде и быстро с током крови попадать в нужное место (Бышевский А.ТТТ. с соавт., 2005; Подосиновикова Н.П., Петров В.В., Долго-Сабуров В.Б.,
2005). В последние годы в медицинской практике широкое использование для профилактики и лечения различных патологических состояний получили пре-параты-антиоксиданты мексидол и эмоксипин (Машковский, 1993; Дюмаев, Воронина, Смирнов, 1995). Эмоксипин (3-окси-6-метил-2-этилпиридина хлорид) и Мексидол (3-окси-6-метил-2-этилпиридина сукцинат) являются производными одного вещества - 3-оксипиридина, различающимися только кислотой в составе соли. Однако кислоты обуславливают различия в фармакологических свойствах данных препаратов, например, различия в антигипоксической активности (Лукьянова, Романова, 1990). Представляется логичным поиск новых лекарственных средств среди других солей 3-оксипиридина.
Исследование вновь синтезированных биологически активных веществ начинают с определения токсичности, что позволяет установить диапазон переносимых и смертельных доз новых веществ, а также дает возможность судить не только об их общей токсичности, но и выбрать эффективные дозы для дальнейшего изучения их антиоксидантной активности.
Для оценки специфической антиоксидантной активности потенциальных лекарственных средств важным и необходимым является использование моделей окислительного стресса. Наиболее часто применяют модель иммобилиза ции животных, т.к. даже кратковременная иммобилизация (экспозиция, начиная с 30 минут) способна вызвать стойкое снижение ресурсов организма и возникновение выраженного окислительного стресса (Кравцов и соавт., 2006; Герасимова и соавт., 2007; Зорькина, Костина, Инчина, 1998; Рудько, Давыдов 2001; Агаева, Фастова, 2003).
В работе были использованы новые соединения 3-оксипиридина (3-ОП оксалат, 3-ОП малонат, 3-ОП адипинат, 3-ОП малеат, 3-ОП гемисукцинат), синтезированные в Институте биохимической физики имени Н. М. Эмануэля РАН и ГУ НИИ Фармакологии РАМН.
ЦЕЛЬ И ЗАДАЧИ ИССЛЕДОВАНИЯ.
Цель работы заключалась в изучении общетоксического и антиоксидант-ного действия новых производных 3-оксипиридина (3-ОП оксалата, 3-ОП ма-лоната, 3-ОП адипината, 3-ОП малеата, 3-ОП гемисукцината) в норме и при иммобилизационном стрессе у животных в сравнении с эталонным препаратом (мексидол). В соответствии с этим поставлены следующие экспериментальные задачи:
1. Исследовать общетоксическое действие (летальность, поведение, масса крыс и их внутренних органов) и определить условные эффективные дозы (1% и 10% от ЛД50) при иммобилизации и введении 3-ОП оксалата, 3-ОП малона-та, 3-ОП адипината, 3-ОП малеата, 3-ОП гемисукцината.
2. Изучить показатели перекисного окисления липидов и показатели ан-тиоксидантной системы (ИБХЛ, показатели липопероксидации) сыворотки крови при введении 3-ОП оксалата, 3-ОП малоната, 3-ОП адипината, 3-ОП малеата, 3-ОП гемисукцината в дозах 1% и 10% от ЛД50 на фоне иммобилизаци-онного стресса.
3. Обосновать необходимость дальнейшего углубленного изучения в качестве антиоксидантов определенных производных 3-оксипиридина.
4. Оценить используемую в данной работе модель иммобилизационного стресса в качестве модели для скринингового исследования про- и антиокси-дантных свойств вновь синтезированных соединений.
НАУЧНАЯ НОВИЗНА.
Впервые изучена токсичность по параметрам ЛД50, летальность, поведение и изменение массы крыс и их внутренних органов для 3-ОП оксалата, 3-ОП малеата и 3-ОП гемисукцината, 3-ОП малоната и 3-ОП адипината при однократном внутрибрюшинном введении. Полученные данные об особенностях общетоксического действия изучаемых производных 3-ОП в дозах 1% и 10% от ЛД50 свидетельствуют о том, что это действие характеризуется разнонаправленной динамикой изменения массы внутренних органов экспериментальных животных при введении различных производных 3-ОП, определенной органо-тропностью, а также тем, что это действие является дозозависимым. Изучены показатели ПОЛ (ИБХЛ, перекисный метаболизм) при введении 3-ОП оксалата, 3-ОП малоната, 3-ОП адипината, 3-ОП малеата, 3-ОП гемисукцината в дозах 1% и 10% от ЛД50 на фоне иммобилизационного стресса. Полученные изменения показателей ПОЛ свидетельствуют о различной степени их выраженности под влиянием изучаемых соединений и зависимости от дозы.
ПРАКТИЧЕСКАЯ ЗНАЧИМОСТЬ РАБОТЫ.
Полученные в работе экспериментальные данные являются основанием для дальнейшего изучения антиоксидантных эффектов новых производных 3-оксипиридина (3-ОП оксалата, 3-ОП малоната, 3-ОП адипината, 3-ОП малеата, 3-ОП гемисукцината) с учетом данных по общетоксическому действию и химической структуры изучаемого соединения.
ОСНОВНЫЕ ПОЛОЖЕНИЯ, ВЫНОСИМЫЕ НА ЗАЩИТУ.
1. По степени уменьшения острой токсичности при однократном внутри-брюшинном введении крысам исследуемые производные 3-оксипиридина можно расположить в следующей последовательности: 3-ОП оксалат, 3-ОП геми-сукцинат, 3-ОП малеат, 3-ОП малонат, мексидол, 3-ОП адипинат.
2. 3-ОП оксалат, 3-ОП малонат, 3-ОП малеат и 3-ОП гемисукцинат увеличивают свободнорадикальную и снижают общую антиоксидантную активность, т.е. проявляют прооксидантные свойства. Наиболее выражена антиокси-дантная активность у 3-ОП адипината, сходная с активностью мексидола.
3. Учитывая данные по токсичности и выявленную антиоксидантную активность, 3-ОП адипинат может быть рекомендован для дальнейшего изучения в качестве перспективного антиоксидантного средства.
АПРОБАЦИЯ РАБОТЫ.
Основные результаты диссертации докладывались на: XX съезде физиологического общества имени И.П. Павлова «Нейрофизиология», Москва, 2007 год; V Всемирном конгрессе по иммунопатологии и аллергии, V Европейском конгрессе по астме «Аллергология и иммунология», Москва, 2007 год; III съезде фармакологов России «Фармакология практическому здравоохранению», Санкт-Петербург, 2007 год.
ПУБЛИКАЦИИ.
По материалам диссертации опубликовано 6 работ.
